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無(wú)血清培養(yǎng)基更換后細(xì)胞大量死亡的原因探究

發(fā)布時(shí)間： 2022-02-14　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1678次

　　無(wú)血清培養(yǎng)基(SFM)是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個(gè)別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎(chǔ)培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿(mǎn)足大部分細(xì)胞培養(yǎng)的要求，但對(duì)有些實(shí)驗(yàn)卻不適合，如觀察一種生長(zhǎng)因子對(duì)某種細(xì)胞的作用，這時(shí)需要排除其他生長(zhǎng)因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長(zhǎng)因子；又如需要測(cè)定某種細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中分泌某種物質(zhì)（抗體、生長(zhǎng)因子）的能力；或者要大規(guī)模的培養(yǎng)某種細(xì)胞，以獲得它們的分泌產(chǎn)物。因此研制出無(wú)血清培養(yǎng)基一直是生物科學(xué)工作者努力的目標(biāo)。
　　科研實(shí)驗(yàn)使用轉(zhuǎn)染細(xì)胞在轉(zhuǎn)染前要換上無(wú)血清培養(yǎng)基。本來(lái)?xiàng)l件好好的，轉(zhuǎn)染效率也可以接受。但是過(guò)了一段時(shí)間就發(fā)生了細(xì)胞在有血清的培養(yǎng)基中長(zhǎng)的好好的，一換無(wú)血清的培養(yǎng)基就死亡的現(xiàn)象。大概4個(gè)小時(shí)就能看到較多的細(xì)胞飄起來(lái)。換了不同批次的培養(yǎng)基，但仍不行，這是怎么回事呢？
　　解析：
　　1.兩周后的培養(yǎng)液應(yīng)補(bǔ)加谷氨酰胺，或者重新配液，轉(zhuǎn)染時(shí)應(yīng)不含抗生素。
　　2.確認(rèn)操作方法和環(huán)境，建議檢查一下。
　　3.脂質(zhì)體的毒性很大，如果有質(zhì)粒參與對(duì)細(xì)胞損傷更大，如果在常溫放置過(guò)，對(duì)細(xì)胞更大，假期冰箱是否斷過(guò)電。
　　4.培養(yǎng)箱的溫度、CO2濃度，濕度等。

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