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免疫組化實驗詳細步驟匯總

發(fā)布時間： 2024-06-11　　點擊次數(shù)： 1321次

步驟：
1.切片準備：將組織進行石蠟包埋，切成薄片并貼附于載玻片上。-用到的產(chǎn)品：載玻片等。
2.烤片：將切片放入烤箱中適當(dāng)溫度烤片，使切片緊密貼附。
3.脫蠟：依次使用二甲苯等進行脫蠟處理。
- 用到的產(chǎn)品：二甲苯、乙醇等。
4.水化：梯度乙醇水化至水。
5.抗原修復(fù)：根據(jù)需要選擇合適的抗原修復(fù)方法，如熱修復(fù)或酶修復(fù)等。
- 用到的產(chǎn)品：抗原修復(fù)液等。
6. 滅活內(nèi)源性過氧化物酶：使用過氧化氫溶液處理。
- 用到的產(chǎn)品：3%過氧化氫溶液。
7. 封閉：用血清或 BSA 等封閉非特異性結(jié)合位點。
- 用到的產(chǎn)品：封閉液。
8. 一抗孵育：滴加特異性一抗，濕盒中孵育。
- 用到的產(chǎn)品：一抗。
9. 洗片：用 PBS 多次沖洗。
10. 二抗孵育：加入相應(yīng)二抗孵育。
- 用到的產(chǎn)品：二抗。
11. 洗片：再次 PBS 洗。
12. 顯色：使用合適的顯色劑顯色，如 DAB 等。
- 用到的產(chǎn)品：DAB 顯色試劑盒等。
13. 復(fù)染：如用蘇木精復(fù)染細胞核。
- 用到的產(chǎn)品：蘇木精染液等。
14. 脫水透明：梯度乙醇脫水，二甲苯透明。
15. 封片：中性樹膠封片。

需要注意的是，具體步驟和產(chǎn)品可能因?qū)嶒灄l件和抗體要求等有所不同，在實際操作中需根據(jù)實際情況進行調(diào)整和優(yōu)化。

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