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CaCl2 法制備感受態細胞
發布時間： 2021-12-24 點擊次數： 1866次材料與儀器
【 器材 】 1 ．培養皿 2 ．恒溫培養箱 【試劑 】 1 ． LB 培養基 2 ．選擇性 LB 瓊脂培養平板（含氨芐青霉素，終濃度為 50μg/ml ） 3 ．氨芐青霉素 100 mg/ml 4 ．宿主細菌：經 100 mmol/L CaCl 2 處理的感受態細菌 DH5α
步驟
取 50 μL 大腸桿菌感受態細胞，加入適量質粒（體積不得超過 4 μL ）冰浴 30 min 后， 42℃ 熱激 90 s ，馬上放回冰上，冰浴 2 min ；加 400 μL LB 培養基，于 37℃ 搖床慢搖振蕩培養 45-60 min ；取 50-100 μL 涂在含有氨芐青霉素（ 100 μg/mL ）的 LB 固體培養基上， 37℃ 倒置培養過夜。
注意事項
嚴格按照順序加入試劑
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