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如何選擇細胞培養用液和使用注意事項
發布時間： 2021-12-08 點擊次數： 2279次細胞培養當中，選擇好合適的培養用液和正確使用培養用液都是細胞培養得好的關鍵，本期小編結合過往經驗分享給大家，希望能給大家的細胞培養帶來幫助。
1、如何正確選擇培養基種類？
引用幾款比較經典的培養基舉例：
2、如何選用特殊細胞系培養基？
培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在 MEM 中培養的細胞，很可能在 DMEM 或 M199 中同樣很容易生長。總之，首先選 MEM 做粘附細胞培養，RPMI-1640 做懸浮細胞培養是一個好的開始。
3、什么培養基中可以省去加酚紅？
酚紅在培養基中被用來作為 PH 值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素）。為避免固醇類反應，培養細胞，尤其是哺乳類細胞時，用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測，一些研究人員在做流式細胞檢測時，不使用加有酚紅的培養基。
4、細胞培養基的配制和儲存應該注意什么？
細胞培養基配好后，要先抽取少許放入培養瓶內在37℃培養箱內放置24~48h，已檢測培養液是否有污染，然后方可用于實驗。配置培養基所需的血清要合格并且保持穩定。一個批號試用效果良好后，就可一次購入較多同一批號的血清，這樣實驗條件穩定，配液時調整pH值較容易。每次配液量以使用兩周左右的量為宜，一次配液不要太多，一是短期內用不完造成營養成分損失需要補充，二是量大易造成污染。
5、為何培養基保存于 4 ℃ 冰箱中，顏色會偏紫色？
培養基保存于 4 ℃ 冰箱中，培養基內的 CO2 會逐漸溢出，造成培養基越來越偏堿性，而培養基中的酸堿指示劑 （通常為 phenol red） 的顏色也會隨堿性增加而更偏紫色。培養基偏堿的結果， 將造成細胞生長停滯或死亡。若培養基偏堿時，可以通入無菌過濾 CO2，以調整 pH 值。
6、什么情況下用到無血清培養基？
對于應用培養細胞進行分離制備細胞生長因子、單克隆抗體等應該選擇無血清培養基。
7、如何選擇正確的血清種類？
8、可否使用與原先培養條件不同的血清種類？
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
9、血清滅活是否必須？
一般情況下不建議。熱滅活是以 56℃，30 分鐘來處理已解凍的血清，因為此加熱步驟，可以使補體去活化，而補體所參與的反應有：溶細胞活性，平滑肌的收縮，肥大細胞和血小板組胺的釋放，增強吞噬作用，淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。
實驗顯示，經過正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多， 這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察，像是 "小黑點"，常常會讓研究者 誤以為是血清遭受污染，而把血清放在 37C 環境中，又會使此沉淀 物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此除了做免疫學相關實驗和培養一些特定細胞，如平滑肌細胞、胚胎干細胞等，不需要做熱滅活處理。
10、培養基中是否添加抗生素？
除特殊篩選系統中外，一般正常培養狀態下，培養基中不應添加任何抗生素。
11、何時更換培養基？
視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上的更換時間，按時更換培養基即可。
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